ラットのメサンギウム細胞におけるピロトーシスの抑制（メチル化の調節）
Huaier attenuates the adverse effects of pyroptosis by regulating the methylation of rat mesangial cells: an in vitro study.
Vol 22, Issue 1
BMC Complementary Medicine and Therapies2022年3月／Volume 22, Issue 1
BioMed Central（Springer Nature）
腎臓の糸球体にあるメサンギウム細胞で、炎症を伴う細胞死（ピロトーシス）が起こるか、フアイアがこれにどう作用するかを調べた研究である。ラットのメサンギウム細胞を抗 Thy-1 抗体（OX7）と正常ラット血清で刺激すると細胞が溶解し、IL-18・IL-1β などの炎症性サイトカインが放出された。フアイア（1・5・10 mg/mL）は細胞の溶解と炎症性サイトカインを抑え、ピロトーシスに関わる GSDME の発現を抑えたと報告されている。著者らはメチル化の調節が関わると解釈している。培養細胞での研究であり、ヒトでの有効性を示すものではない。
- JOURNAL
- BMC Complement Med Ther
- VOL / ISSUE
- 22 (1)
- PAGES
- 92
- PUBLISHED
- 2022年3月
- DOI
- 10.1186/s12906-022-03559-4
- PUBMED
- 35351070
- PMCID
- PMC8966145
- VERIFIED
- 抄録に基づく（原著全文との照合前）
抄録ABSTRACT
【目的】ラットのメサンギウム細胞（腎臓の糸球体の細胞、RMC）でピロトーシス（炎症を伴う細胞死）が起こるか、フアイアがこれにどう作用するかを調べた。
【方法】RMC を OX7 抗体（0.5・2.5・10 μg/mL）、正常ラット血清（NRS）、フアイア（1・5・10 mg/mL）とともに培養した。細胞の形態を光学顕微鏡と免疫蛍光で観察し、LDH の放出量、ウェスタンブロットで調べた。さらにメチル化酵素 DNMT3B と脱メチル化剤 5-aza-2′-deoxycytidine を作用させた。
【結果】OX7 抗体と NRS で刺激すると RMC は溶解し、炎症性サイトカイン（IL-18、IL-1β、MCP-1、ICAM-1）を放出した。フアイアは溶解と炎症性サイトカインを抑えて RMC を保護した。溶解は GSDME の陽性発現からピロトーシスによるものとみられた。DNMT3B は OX7＋NRS で誘導された GSDME の発現を下げ、フアイアは 5-aza-2′-deoxycytidine で増えた GSDME の発現を有意に抑えた。
【著者の結論】RMC ではピロトーシスが起こりうる可能性があり、フアイアは一群の分子のメチル化を高めることで RMC を保護しうるとした。
【読み方の注意】培養細胞での結果であり、人での効果を示すものではない。
【原著の数値】LDH の放出は、2・4 時間時点では 5・10 mg/mL で、8 時間時点では 1・5・10 mg/mL のすべてで刺激のみの群より有意に少なかった（P < 0.05）。10 mg/mL で ICAM-1、IL-18、MCP-1 は有意に低下したが、IL-1β の低下は有意ではなかった。原著全文との照合は未実施
PubMed に掲載された抄録の記載に基づき、本会が日本語に要約したものである。原著の抄録の逐語訳ではない。訳：日本フアイア研究会 事務局
原文の抄録は PubMed で読める。抄録は発行元の著作物にあたるため、本会のサイトには転載せず、原文へのリンクを示す。
何をどう調べたかSTUDY FLOW
読み解きの要点KEY POINTS
基礎研究は、ヒトでの効果を示すものではありません。何が示され、何が示されていないかを、原著の記載の範囲で整理します。
何を使ったのか
フアイア（Trametes robiniophila Murr）である。抄録では抽出物の種類（水抽出物か、多糖か）は明記されていない。単一成分ではなく、配合製剤でもない。
どのような実験系か
ラットの腎臓から得たメサンギウム細胞（RMC）を用いた培養実験である。抗 Thy-1 抗体（OX7、0.5・2.5・10 μg/mL）と正常ラット血清（NRS）で細胞を刺激し、フアイア 1・5・10 mg/mL を加えた。動物への投与は含まれていない。
原著の数値では、処理時間は 2・4・8・48 時間とされ、各実験は 3 回以上繰り返されたとされる。
何が示されたか
OX7 と NRS で刺激すると RMC は溶解し、IL-18、IL-1β、MCP-1、ICAM-1 を放出した。フアイアは溶解と炎症性サイトカインの量を抑えて RMC を保護したと報告されている。
原著の数値では、LDH の放出は 2・4 時間時点で 5・10 mg/mL、8 時間時点で 1・5・10 mg/mL のすべてで刺激のみの群より有意に少なかった（P < 0.05）とされる。10 mg/mL で ICAM-1、IL-18、MCP-1 は有意に低下したが、IL-1β の低下は有意ではなかったとされる。
どの経路が関わるとされたか
ピロトーシスの実行分子である GSDME と、DNA のメチル化である。メチル化酵素 DNMT3B は OX7＋NRS で誘導された GSDME の発現を下げ、フアイアは脱メチル化剤 5-aza-2′-deoxycytidine で増えた GSDME の発現を有意に抑えた。
著者らは、フアイアが「一群の分子のメチル化を高める」ことで RMC を保護しうると結論している。どの分子のメチル化が変化したかは抄録に記載がない。
この研究から言えないことは何か
第一に、ヒトでの有効性および安全性。本研究はラットの培養細胞を対象としており、腎疾患の患者を対象とした検証は含まれていない。
第二に、生体での再現性。刺激で起こした細胞傷害は、糸球体腎炎の病態の一部を模したものであり、動物モデルや患者で同じ作用が起こるかは示されていない。
第三に、濃度の換算。培養液中の mg/mL 単位の濃度を、内服したときの体内濃度に置き換えることはできない。
第四に、がんとの関係。本研究は腎臓の細胞の炎症性の細胞死を扱っており、がんに対する作用を調べたものではない。
結果RESULTS
| 項目 | 報告されている内容 |
|---|---|
| 細胞の溶解 | OX7＋NRS の刺激で RMC が溶解。フアイアで抑制 |
| LDH の放出 | 2・4 時間時点で 5・10 mg/mL、8 時間時点で 1・5・10 mg/mL で刺激のみより有意に少ない（P < 0.05） |
| 炎症性サイトカイン | IL-18・IL-1β・MCP-1・ICAM-1 の放出をフアイアが抑制。10 mg/mL で IL-1β の低下は有意でなかった |
| ピロトーシスの指標 | GSDME の陽性発現。フアイアで発現が抑制 |
| メチル化 | DNMT3B が GSDME 発現を低下。フアイアは脱メチル化剤で増えた GSDME 発現を有意に抑制 |
出典：BMC Complement Med Ther. 2022;22(1):92。数値は抄録などの記載を本会が転記したもの。原著の表を複製したものではない。
原著の記載AS REPORTED
- 研究デザイン
- in vitro（培養細胞）
- 対象
- ラットのメサンギウム細胞（RMC）
- 例数
- 該当なし（培養細胞：ラットメサンギウム細胞株 HBZY-1）。独立した反復回数の記載なし。正常ラット血清の調製に雄性 SD ラット 10 匹を使用
- 介入
- フアイア水抽出物（熱水抽出・限外ろ過・濃縮で得たもの。1 g を PBS 10 ml に溶解）を 1、5、10 mg/ml でラットメサンギウム細胞に添加（形態観察は 10 mg/ml）。抗 Thy-1 抗体 OX7（2.5 μg/ml、形態観察では 0.5・2.5・10 μg/ml）で 60 分感作後、8% 正常ラット血清と同時に添加し、2〜8 時間（LDH）、4 時間（免疫蛍光・ウェスタンブロット）、24 時間以内（形態）培養。メチル化実験ではフアイア 1 mg/ml と 5-aza-2′-デオキシシチジン 10 μM を 48 時間
- 対照
- OX7 抗体＋正常ラット血清による刺激のみ、無処理の細胞
- 評価項目
- 細胞の形態、LDH の放出、炎症性サイトカイン、GSDME の発現、メチル化酵素・脱メチル化剤の影響
- 主要な結果
- フアイアは刺激による RMC の溶解と炎症性サイトカインの放出を抑え、GSDME の発現を抑えた
- 資金源
- 中国国家自然科学基金（81804056）、State Key Laboratory of Dampness Syndrome of Chinese Medicine（SZ2020ZZ07）
- 利益相反
- なし（原著の記載：The authors have no conflicts of interest to declare.）
資金源および利益相反は、結果の読み方に直接関わる情報であるため、本会は原則としてこの欄を省略しない。
この研究の結果を適用できる範囲APPLICABILITY
| 観点 | 本研究が扱った範囲 | 本研究が扱っていない範囲 |
|---|---|---|
| 対象 | ラットのメサンギウム細胞 | ヒトの細胞、動物の生体、患者での検証 |
| 被験物質 | フアイア | 個々の成分の寄与、市販の製剤との同等性 |
| 投与量 | 培養液中の濃度 1〜10 mg/mL | 内服での用量、体内濃度への換算 |
| 疾患 | 抗体刺激による糸球体の細胞傷害のモデル | 糸球体腎炎などの実際の腎疾患、がん |
| 評価 | 細胞の溶解・サイトカイン・GSDME・メチル化 | 腎機能、尿蛋白などの臨床的な評価項目 |
本会の記録SOCIETY RECORD
- 収載の根拠
- 本会の掲載基準 ver.1.2.1 に基づき、事務局が収載
- 照合の状態
- 抄録で確認
本会はこの研究を実施していない。本ページは原著の記載を整理したものであり、診療上の判断は原著および最新の知見に基づいて行われたい。
翻訳・引用・数値に誤りを見つけた場合は、本会の訂正窓口 までお知らせください。個別の医療相談、診療機関の紹介、製品に関するお問い合わせには対応しておりません。
掲載誌についてABOUT THE JOURNAL
- 誌名
- BMC Complementary Medicine and Therapies（BMC Complement Med Ther）
- 発行元
- BioMed Central（Springer Nature）
- 創刊
- 2020年
- 分野
- 補完・代替医療（基礎・トランスレーショナル・臨床）
- 査読
- トランスペアレント査読（査読報告を論文と共に公開、査読者名は非公開）
- 公開方式
- オープンアクセス（著者が掲載料を負担）
- 索引
- MEDLINE 収載（現在、2020年 v.20〜）、PMC 収載
- インパクトファクター
- 4.4（2025年版）
- サイト
- 掲載誌の公式サイト ↗
書誌・索引は NLM Catalog、査読の方式・公開方式・インパクトファクター（Clarivate Journal Citation Reports）は掲載誌の公式サイトの記載による（2026年10月確認）。学術誌に掲載されたことは査読の水準を満たしたことを示すが、結果が正しいことを保証するものではない。本会は掲載誌およびその評価指標を収載の判断に用いない。
引用の形式CITATION
Geng W, Tu C, Chen D, et al. Huaier attenuates the adverse effects of pyroptosis by regulating the methylation of rat mesangial cells: an in vitro study. BMC Complement Med Ther. 2022;22(1):92. doi:10.1186/s12906-022-03559-4