トリプルネガティブ乳がんにおける免疫原性細胞死の誘導（circCLASP1／PKR／eIF2α）
Huaier Induces Immunogenic Cell Death Via CircCLASP1/PKR/eIF2α Signaling Pathway in Triple Negative Breast Cancer.
Vol 10
Frontiers in Cell and Developmental Biology2022年／Volume 10
Frontiers Media
トリプルネガティブ乳がん（TNBC）で、フアイアが免疫原性細胞死（ICD、免疫を呼び起こす形のがん細胞死）を起こすかを、その仕組みとあわせて培養細胞とマウスで調べた研究である。研究者らは、フアイアが TNBC 細胞でカルレティキュリン（CRT）の細胞表面への露出を促し、ATP と HMGB1 の放出を増やしたと報告している。マウスへの経口投与で腫瘍内のリンパ球が集まり、腫瘍の増殖が有意に遅れたが、T 細胞を除くとこの作用は消えたとされる。原著の数値では、経口投与試験は各群 6 匹・16 日間とされる。培養細胞とマウスでの研究であり、ヒトでの有効性を示すものではない。
- JOURNAL
- Front Cell Dev Biol
- VOL / ISSUE
- 10
- PAGES
- 913824
- PUBLISHED
- 2022年
- DOI
- 10.3389/fcell.2022.913824
- PUBMED
- 35784473
- PMCID
- PMC9243662
- VERIFIED
- 抄録に基づく（原著全文との照合前）
抄録ABSTRACT
【目的】トリプルネガティブ乳がん（TNBC）で、フアイアが免疫原性細胞死（ICD、免疫を呼び起こす形のがん細胞死）を起こすかを、その仕組みとあわせて調べた。
【方法】TNBC 細胞にフアイアを作用させ、カルレティキュリン（CRT）の細胞表面への露出、ATP と HMGB1 の放出を調べた。処理した細胞と樹状細胞を共培養し、細胞ワクチン試験も行った。移植腫瘍マウスにフアイアを経口投与し、腫瘍内リンパ球（TIL）と腫瘍増殖を評価し、T 細胞を除いた条件と比べた。小胞体ストレスと eIF2α 経路、circCLASP1 と PKR の関係を調べた。用量・期間・匹数は抄録に記載がない。
【結果】フアイアは CRT の露出を促し、ATP と HMGB1 の放出を増やして ICD を起こした。処理細胞との共培養で樹状細胞の成熟が高まった。経口投与で TIL が集まり、腫瘍の増殖が有意に遅れたが、内因性 T 細胞を除くとこの作用は消えた。フアイアは eIF2α 経路を介した小胞体ストレス関連の ICD を起こし、circCLASP1 が細胞質で PKR と結合してその分解を妨げることが関わっていた。
【著者の結論】circCLASP1/PKR/eIF2α 経路がフアイアによる ICD に重要であり、フアイアは TNBC 患者の長期寛解に向けた選択肢となりうる。
【読み方の注意】培養細胞と動物での結果であり、人での効果を示すものではない。
【原著の数値】フアイアで処理した 4T1 細胞を接種したマウス（各群 6 匹、20 日間観察）は、生きた腫瘍細胞の再接種後の無腫瘍期間が延びた（P<0.01）。経口投与試験（各群 6 匹、16 日間）では 16 日目の腫瘍増殖が対照より抑えられた（P<0.01）が、抗 CD8 抗体で T 細胞を除くとこの作用はほぼ消えた。RNA シークエンスでは発現が上昇した遺伝子 481 個、低下した遺伝子 459 個が同定された。原著全文との照合は未実施
PubMed に掲載された抄録の記載に基づき、本会が日本語に要約したものである。原著の抄録の逐語訳ではない。訳：日本フアイア研究会 事務局
原文の抄録は PubMed で読める。抄録は発行元の著作物にあたるため、本会のサイトには転載せず、原文へのリンクを示す。
何をどう調べたかSTUDY FLOW
読み解きの要点KEY POINTS
基礎研究は、ヒトでの効果を示すものではありません。何が示され、何が示されていないかを、原著の記載の範囲で整理します。
何を使ったのか
フアイア（Trametes robiniophila Murr）である。抄録には抽出の方法の記載がない。原著の数値では熱水抽出物とされる。単一成分や多糖を取り出したものではなく、配合製剤でもない。
どのような実験系か
TNBC 細胞を用いた培養実験（CRT の露出、ATP・HMGB1 の放出）、処理した細胞と樹状細胞の共培養、細胞ワクチン試験、移植腫瘍マウスへの経口投与と T 細胞を除いた条件との比較、および小胞体ストレス・eIF2α 経路・circCLASP1 と PKR の解析である。
原著の数値では、細胞に 0〜8 mg/mL を 24・48 時間、マウスには 50 mg/100 μL を 2 日おきに経口投与し、各群 6 匹とされる。
何が示されたか
フアイアは CRT の露出を促し、ATP と HMGB1 の放出を増やして ICD を起こした。処理細胞との共培養で樹状細胞の成熟が高まった。マウスへの経口投与で腫瘍内リンパ球が集まり、腫瘍の増殖が有意に遅れたが、内因性 T 細胞を除くとこの作用は消えたと報告されている。
原著の数値として、フアイアで処理した 4T1 細胞を接種したマウス（各群 6 匹、20 日間観察）では再接種後の無腫瘍期間が延び（P<0.01）、経口投与試験（各群 6 匹、16 日間）では 16 日目の腫瘍増殖が対照より抑えられた（P<0.01）とされる。
どの経路が関わるとされたか
eIF2α の経路を介した小胞体ストレスに関連する ICD である。さらに、circCLASP1 が細胞質で PKR と結合してその分解を妨げることが、フアイアによる免疫原性の誘導に関わっていたとされる。
原著の数値として、RNA シークエンスで発現が上昇した遺伝子 481 個、低下した遺伝子 459 個が同定されたとされる。
この研究から言えないことは何か
第一に、ヒトでの有効性および安全性。本研究は培養細胞とマウスを対象としており、TNBC の患者を対象とした検証は含まれていない。著者らは長期寛解に向けた選択肢となりうると述べているが、患者で確かめられたものではない。
第二に、免疫の働きの違い。マウスの免疫での結果が、ヒトの腫瘍の免疫環境でも同じように起こるかは分からない。
第三に、他の治療との関係。免疫チェックポイント阻害薬や抗がん剤との併用は、抄録の範囲では検証されていない。
結果RESULTS
| 項目 | 報告されている内容 |
|---|---|
| 免疫原性細胞死の指標 | CRT の露出 ↑、ATP と HMGB1 の放出 ↑ |
| 樹状細胞 | 処理細胞との共培養で成熟が増強。細胞ワクチン試験で確認 |
| マウス（経口投与） | 腫瘍内リンパ球が集積し、腫瘍の増殖が有意に遅延 |
| T 細胞の除去 | 腫瘍の増殖を遅らせる作用が消失 |
| 経路 | eIF2α 経路を介した小胞体ストレス関連の ICD。circCLASP1 が PKR と結合して分解を妨げる |
| ワクチン試験・経口投与試験 | 各群 6 匹。無腫瘍期間の延長、16 日目の腫瘍増殖の抑制（いずれも P<0.01） |
| RNA シークエンス | 上昇 481 遺伝子、低下 459 遺伝子 |
出典：Front Cell Dev Biol. 2022;10:913824。数値は抄録などの記載を本会が転記したもの。原著の表を複製したものではない。
原著の記載AS REPORTED
- 研究デザイン
- in vitro（培養細胞）および in vivo（マウス）
- 対象
- トリプルネガティブ乳がん（TNBC）細胞株：マウス 4T1、ヒト MDA-MB-231・MDA-MB-468。BALB/c 雌マウス由来の骨髄樹状細胞（BMDC）。動物は免疫正常 BALB/c 雌マウス（4〜6 週齢）
- 例数
- ワクチン接種実験：各群 6 匹（3 群）。腫瘍浸潤細胞解析：各群 3 匹。CD8+ T 細胞除去実験：各群 6 匹（4 群）。細胞実験は各 3 連（triplicate）
- 介入
- フアイア水抽出物。in vitro では濃度・時間を変えて処理（ATP 測定は 24・48 時間、DC 活性化試験は 24 時間処理後に共培養）。in vivo では 4T1 担がんマウスに 1 回 50 mg/100 μL を 2 日ごとに経口胃内投与、16 日目に評価。CD8+ T 細胞除去群は抗 CD8α 抗体 100 μg を −2、2、8、14 日目に投与（フアイア併用群あり）。ワクチン試験ではフアイアで 24 時間処理した 4T1 細胞 5 × 10^5 個を皮下接種
- 対照
- フアイアを投与しない細胞・マウス、T 細胞を除いた条件
- 評価項目
- CRT の露出、ATP・HMGB1 の放出、樹状細胞の成熟、腫瘍内リンパ球、腫瘍の増殖、小胞体ストレス・eIF2α 経路、circCLASP1 と PKR
- 主要な結果
- circCLASP1／PKR／eIF2α 経路を介した免疫原性細胞死の誘導と、T 細胞に依存した腫瘍増殖の遅延
- 資金源
- 中国国家重点研究開発計画（2020YFA0712400）、泰山学者特別基金（ts20190971）、中国国家自然科学基金（81874119、82072912、82004122）、中国博士後科学基金（2020M682199）、山東省自然科学基金（ZR2020QH335、ZR2019LZL003）、Chen Xiao-ping Foundation for the Development of Science and Technology of Hubei Province（CXPJJH121001-2021003）
- 利益相反
- なし（原著の記載：The authors declare that the research was conducted in the absence of any commercial or financial relationships that could be construed as a potential conflict of interest.）
資金源および利益相反は、結果の読み方に直接関わる情報であるため、本会は原則としてこの欄を省略しない。
この研究の結果を適用できる範囲APPLICABILITY
| 観点 | 本研究が扱った範囲 | 本研究が扱っていない範囲 |
|---|---|---|
| 対象 | TNBC 細胞およびマウス | ヒトでの検証（有効性・安全性） |
| 被験物質 | フアイア（熱水抽出物） | 個々の成分の寄与、市販の製剤との同等性 |
| 投与量 | マウスでの経口投与 | ヒトでの用量、用量の換算 |
| 併用 | 検討なし | 免疫チェックポイント阻害薬・抗がん剤などとの併用 |
| 評価 | 免疫原性細胞死の指標、免疫細胞、腫瘍の増殖 | 患者の寛解・生存期間などの臨床的な評価項目 |
本会の記録SOCIETY RECORD
- 収載の根拠
- 本会の掲載基準 ver.1.2.1 に基づき、事務局が収載
- 照合の状態
- 抄録で確認
本会はこの研究を実施していない。本ページは原著の記載を整理したものであり、診療上の判断は原著および最新の知見に基づいて行われたい。
翻訳・引用・数値に誤りを見つけた場合は、本会の訂正窓口 までお知らせください。個別の医療相談、診療機関の紹介、製品に関するお問い合わせには対応しておりません。
掲載誌についてABOUT THE JOURNAL
- 誌名
- Frontiers in Cell and Developmental Biology（Front Cell Dev Biol）
- 発行元
- Frontiers Media S.A.
- 創刊
- 2013年
- 分野
- 細胞生物学・発生生物学
- 査読
- 査読中は査読者名を著者に非公開、掲載時に査読者・担当編集者の氏名を論文上で公開（Frontiers 共通の対話型査読）
- 公開方式
- オープンアクセス（著者が掲載料を負担）
- 索引
- MEDLINE 非収載（PubMed Central 収載）
- インパクトファクター
- 5.3
- サイト
- 掲載誌の公式サイト ↗
書誌・索引は NLM Catalog、査読の方式・公開方式・インパクトファクター（Clarivate Journal Citation Reports）は掲載誌の公式サイトの記載による（2026年10月確認）。学術誌に掲載されたことは査読の水準を満たしたことを示すが、結果が正しいことを保証するものではない。本会は掲載誌およびその評価指標を収載の判断に用いない。
引用の形式CITATION
Li C, Wang X, Chen T, et al. Huaier Induces Immunogenic Cell Death Via CircCLASP1/PKR/eIF2α Signaling Pathway in Triple Negative Breast Cancer. Front Cell Dev Biol. 2022;10:913824. doi:10.3389/fcell.2022.913824